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單組分TMB顯色液

3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine Liquid Substrate
Cas 號(hào)： M D L： MFCD00007748
分子式： 分子量：
別 名： 單組分TMB過氧化物酶底物液
訂貨信息：
貨號(hào) 品名 規(guī)格 包裝 單價(jià)
單組分TMB顯色液 組成：TMB，穩(wěn)定劑。 500ml 680元
單組分TMB顯色液 組成：TMB，穩(wěn)定劑。 100ml 180元
單組分TMB顯色液 25ml 60元
性 狀： 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一種過氧化物酶底物，用于ELISA 反應(yīng)。底物產(chǎn)生一種可溶性淡藍(lán)色的末端產(chǎn)物，可在370 或 655 nm在分光光度計(jì)上讀取。TMB反應(yīng)可以用2 M H2SO4 (產(chǎn)生黃色)終止，450 nm讀取。
TMB又分可溶型和沉淀型。 可溶型：與HRP反應(yīng)形成可溶性藍(lán)褐色產(chǎn)物，適用于ELISA及其他通過液體反應(yīng)檢測(cè)HRP的應(yīng)用，與HRP反應(yīng)形成沉淀性藍(lán)褐色產(chǎn)物，一步即用型溶液，無需混合，方便快捷 。 沉淀型：適用于Western Blot及其免疫沉淀化學(xué)等，一步即用型溶液，無需混合，方便快捷 單組分TMB過氧化物酶底物正常情況下淡黃色、淡藍(lán)色或者是淡綠色。底物溶液在650nm時(shí)檢測(cè)OD值小于0.04
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)： 使用方法
使用之前，以超純水反復(fù)洗滌的適當(dāng)容器，倒出適量單組分TMB底物溶液，待溶液達(dá)到室溫即可使用。
加液：加完HRP結(jié)合物并溫育一定時(shí)間后，洗板3－5次，每孔加TMB底物100－150uL， 37°C溫育15－30分鐘。
終止（備選）：加等體積的1N的HCl或者2N的H2SO4來終止反應(yīng)。酶標(biāo)孔中反應(yīng)液從藍(lán)色變?yōu)辄S色。
讀數(shù)：終止反應(yīng)后，30分鐘內(nèi)在450nm處讀數(shù)。不加終止液，顯色更加穩(wěn)定，可以在620－650nm處讀數(shù)。


注意：
降低底物強(qiáng)度：如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景和/或沉淀，表明TMB底物反應(yīng)過于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀，可以在加入終止液后馬上讀數(shù)；另外，可以進(jìn)一步稀釋一抗和 /或HRP結(jié)合物。為了降低非特異性背景顏色，推薦進(jìn)一步降低一抗和/或HRP結(jié)合物的濃度，盡量避免降低底物濃度。動(dòng)力學(xué)檢測(cè)：TMB單組分底物在與過氧化物酶反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種藍(lán)色，可以在加底物后620－650nm處讀數(shù)，不需終止反應(yīng)。


穩(wěn)定性：2－8°C條件下，大于18個(gè)月。
敏感性：相當(dāng)于顯色AB雙液，或高于。
組成：TMB，穩(wěn)定劑。
貯 存： 保存：2－8°C，請(qǐng)勿冷凍。
用途 TMB因其靈敏度較高及無致癌性而得到廣泛應(yīng)用。單組分TMB過氧化物酶底物與辣根過氧化物酶連接物反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種深藍(lán)色的產(chǎn)物，適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當(dāng)中。